A eletroforese de DNA é um método de biologia molecular amplamente utilizado para separar e até mesmo purificar fragmentos de DNA (Ácidos Nucleicos). Essa técnica foi empregada pela primeira vez em 1937 pelo bioquímico sueco Arne Tisélius e permite a migração dessas macromoléculas eletricamente carregadas através de uma corrente elétrica em uma substância gelatinosa (Figura 1).
Figura 1 - A: Esquema demonstrativo do aparato de eletroforese e o gel de separação; e B — Gel de eletroforese demonstrando uma corrida de fragmentos de DNA. Fonte: Arne Tisélius.
Sobre o tema, analise as afirmações a seguir:
I. O objetivo dessa técnica é separar fragmentos de DNA em um gel de poliacrilamida, por propriedades de tamanho e carga.
II. O tamanho dos fragmentos determina a velocidade do seu avanço. Assim, o menor fragmento de DNA na figura 1B está representado na “banda C”.
III. As “bandas” de DNA são evidenciadas no gel através da coloração com Brometo de Etídio (EtBr) que é altamente sensível e tóxico para humanos e permite a sua visualização direta.
IV. As amostras de DNA que são aplicadas nos “poços” do gel de agarose são submetidas a uma diferença de potencial, graças ao uso de eletrodos negativos e positivos, formando-se um campo elétrico suficiente para gerar uma força que direciona o movimento das amostras.
Diante do exposto, as afirmativas estão corretas em: