Um estudo genético foi realizado para determinar o genótipo de três irmãos, filhos dos mesmos pais, em relação ao gene B autossômico, composto por 3 000 pares de bases. Coletaram-se amostras de DNA de cada irmão e, por meio da técnica de PCR, múltiplas cópias deste gene foram feitas in vitro. Em seguida, foi adicionada uma enzima de restrição em cada amostra resultante da PCR. Esta enzima atua apenas sobre o alelo recessivo do gene e entre os pares de bases de número 1 000 e 1 001. Posteriormente, cada amostra resultante foi submetida à eletroforese e o padrão de bandas analisado.
a) Para se conseguir múltiplas cópias deste gene in vitro pela técnica de PCR, que enzima deve ser adicionada ao processo? Como as enzimas de restrição atuam sobre a sequência de DNA do gene recessivo?
b) Enzimas de restrição são encontradas naturalmente em bactérias. Qual a vantagem para estes micro-organismos terem esta enzima em seu citoplasma? Determine o genótipo dos irmãos com relação aos alelos B e b.