A elevação da temperatura causa aumento na velocidade de uma reação catalisada enzimaticamente. Quanto maior a temperatura, maior a velocidade da reação.  

O pH ótimo de atuação de uma enzima corresponde ao pH em que a velocidade da reação é máxima. 

A maioria das enzimas humanas tem temperatura ótima na faixa da temperatura do corpo, ao redor de 37°C. 

A pepsina atua mais eficientemente em pH fortemente ácido, com valor em torno de 2. 

A tripsina atua no ambiente alcalino do intestino, tendo seu pH ótimo em torno de 8.